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ATIVIDADES BIOLÓGICAS E PROSPECÇÃO QUÍMICA DE EXTRATOS DE FUNGOS ENDOFÍTICOS DE Duroia macrophylla HUBER (RUBIACEAE)

Os micro-organismos endofíticos apresentam um enorme potencial para a produção de substâncias bioativas. A planta Duroia macrophylla produz alcaloides com atividade antitumoral e antimicobacteriana, sendo selecionada para a pesquisa do potencial biotecnológico dos seus micro-organismos endofíticos. As folhas de D. macrophylla foram lavadas, submetidas à desinfecção, fragmentadas e inoculadas em BDA e Ágar Sabouraud com oxitetraciclina e incubadas a 30 °C por 20 dias. Isolaram-se 47 fungos e destes, 21 fungos morfologicamente diferentes foram selecionados para a prospecção química e biológica. O cultivo submerso foi realizado em Caldo Sabouraud ou Batata Dextrose, a 26 °C e 120 rpm durante 14-30 dias. Os líquidos metabólicos foram filtrados e submetidos à partição líquido-líquido com diclorometano e acetato de etila. Os metabólitos do micélio foram extraídos em ultrassom com diclorometano, acetato de etila e metanol. Os extratos e fases foram analisados por cromatografia em camada delgada e por ressonância magnética nuclear de 1H. Além disso, eles foram testados quanto às atividades antimicrobiana, antioxidante e contra Artemia salina. Como resultado deste trabalho a taxa de colonização fúngica de D. macrophylla foi de 94%. Nos 21 extratos foram encontrados indícios de substâncias fenólicas, terpenos, açúcares e em quatro deles, alcaloides. As fases AcOEt dos fungos Dm SB 43 e Dm BDA 12c foram ativas contra A. salina, com CL50 de 109,5 e 605,5 µg/mL, respectivamente. Nenhum extrato apresentou atividade antioxidante e 18 mostraram atividade antimicrobiana pelo menos para uma bactéria. O fungo Dm SB 33 apresentou o maior espectro de atividade, sendo ativo contra quatro bactérias: Enterobacter cloacae, Staphylococcus aureus, Acinetobacter baumanii e Pseudomonas aeruginosa. Apenas o fungo Dm SB 33 demonstrou atividade contra S. aureus e não foram observadas atividades contra E. coli. Portanto, este estudo demonstrou a diversidade de classes químicas e o potencial de atividades biológicas dos fungos endofíticos de D. macrophylla.

ATIVIDADES BIOLÓGICAS E PROSPECÇÃO QUÍMICA DE EXTRATOS DE FUNGOS ENDOFÍTICOS DE Duroia macrophylla HUBER (RUBIACEAE)

DOI: 10.22533/at.ed.6192002074

Palavras chave: Amazônia; Biotecnologia; Metabolismo secundário.

Keywords: Amazon; Biotechnology; Secondary metabolism

Abstract:

Endophytic microorganisms have enormous potential for the production of bioactive substances. The plant Duroia macrophylla produces alkaloids with antitumor and antimycobacterial activity, being selected for research on the biotechnological potential of its endophytic microorganisms. The leaves of D. macrophylla were washed and submitted to disinfestation and were later fragmented and inoculated in BDA and Sabouraud Agar with oxytetracycline and incubated at 30 °C for 20 days. 47 fungi were isolated and of these, 21 morphologically different fungi were selected for chemical and biological prospection. The submerged culture was carried out in Sabouraud or Potato Dextrose Medium, incubated at 26 °C, at 120 rpm for 14-30 days. The metabolic liquids were filtered and subjected to liquid-liquid partition with dichloromethane and ethyl acetate (phases DCM and EtOAc). The mycelium metabolites were extracted on ultrasound with dichloromethane, ethyl acetate and methanol. Thin layer chromatography and 1H Nuclear Magnetic Resonance were used to analyze the extracts. The extracts were tested for antimicrobial, antioxidant activities and against A. salina. As a result of this work, the fungal colonization rate of D. macrophylla was 94%. In the 21 extracts were found evidence of phenolic substances, terpenes, sugars and in four of them, alkaloids. The phase EtOAc of the fungi Dm SB 43 and Dm BDA 12c were active against A. salina, with LC50 of 109.5 and 605.5 µg/mL, respectively. No extract showed antioxidant activity and 18 showed antimicrobial activity for at least one bacterium. The fungus Dm SB 33 showed the highest spectrum of activity, being active against four bacteria: Enterobacter cloacae, Staphylococcus aureus, Acinetobacter baumanii and Pseudomonas aeruginosa. Only the fungus Dm SB 33 showed activity against S. aureus. No activity against E. coli was observed. Therefore, this study demonstrated the diversity of chemical classes and the potential for biological activities of the endophytic fungi of D. macrophylla.

Autores

  • Cecilia Veronica Nunez
  • Juliana Gomes de Souza Oliveira